KHẢ NĂNG KHÁNG Vibrio spp. VÀ ĐẶC TÍNH PROBIOTIC CỦA Lactobacillus farciminis HN12

jos.hueuni.edu.vn Tập 131, Số 2A, 2022 91 Vasococcus [6]. Chúng được tìm thấy trong nhiều loại thực phẩm lên men và được sử dụng rộng rãi để nuôi cấy khởi đầu cho các quá trình lên men. Nhiều vi khuẩn acid lactic thể hiện các hoạt động đối kháng với các vi khuẩn khác, bao gồm các sinh vật làm hỏng thực phẩm và các mầm bệnh từ thực phẩm. Một số tác giả trước đây đã công bố về khả năng kháng khuẩn in vitro của các chủng LAB chống lại các vi khuẩn Vibrio spp. khác nhau [7] như V. parahaemolyticus [8] và V. cholerae [9]. Với cơ sở này, chúng tôi tiến hành phân lập vi khuẩn lactic từ thực phẩm lên men, nghiên cứu các hoạt động kháng Vibio spp. phân lập từ tôm, cá bị nhiễm bệnh và các đặc tính lợi khuẩn của các dòng phân lập được chọn với ý tưởng tìm ra được các chủng vi khuẩn lactic có khả năng kháng Vibio spp. mạnh có tiềm năng sử dụng để tạo chế phẩm probiotic cung cấp trong ngành chăn nuôi thủy sản. 2 Phương pháp 2.1 Phân lập vi khuẩn lactic Mẫu mắm nêm được mua tại Chợ Đông Ba, thành phố Huế, tỉnh Thừa Thiên Huế, và mang về phòng thí nghiệm để tiến hành phân lập vi khuẩn. Một gam mẫu được đồng hóa trong 100 mL dung dịch muối sinh lý, sau đó hút 200 μL dịch này chuyển qua ống nghiệm chứa 5 mL môi trường MRS đã được hấp khử trùng, ủ ở 30 °C trong 24 giờ ở điều kiện kỵ khí. Sau khi ủ, dịch nuôi cấy được cấy chuyền qua môi trường MRS agar. Khuẩn lạc đơn được chọn lọc và tiếp tục cấy chuyền lên môi trường MRS bốn lần để thuần khiết khuẩn lạc. Những khuẩn lạc trắng đục hoặc trắng trong, không màu, bờ láng, lồi, bìa nguyên, nằm trên đường cấy

chuyển và không lẫn với những khuẩn lạc có hình thái và màu sắc lạ, có khả năng phân giải CaCO3 được bổ sung trong môi trường được chọn lọc cho nghiên cứu tiếp theo [10]. 2.2 Khảo sát khả năng kháng khuẩn Chủng vi khuẩn được sàng lọc khả năng đối kháng với các chủng vi khuẩn chỉ thị bằng phương pháp khuếch tán đĩa thạch với một vài điều chỉnh nhỏ [11]. Chủng vi khuẩn chỉ thị là V. parahaemolyticus và các chủng Vibrio spp. phân lập từ tôm và cá bị nhiễm bệnh đang lưu giữ tại Viện Công nghệ sinh học, Đại học Huế. Dịch huyền phù của dòng chỉ thị được nhân sinh khối và điều chỉnh để đạt mật độ 108 tế bào/mL. 50 μL dịch nuôi cấy được cấy trải lên môi trường LB đã hấp khử trùng sẵn. Các giếng với đường kính 6 mm được tạo trên trên mặt môi trường bằng thanh kim loại vô trùng. Vi khuẩn lactic được nhân sinh khối trong 5 mL môi trường MRS, lắc 180 vòng/phút ở 30 °C. Sau 24 giờ